革蘭氏陽性細(xì)菌鑒定卡說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱： 革蘭氏陽性細(xì)菌鑒定卡

英文名稱：VITEK 2 Gram-Positive Identification card (VITEK 2 GP Test Kit)

【包裝規(guī)格】

20 測試/盒

【預(yù)期用途】

用于來源于人體并經(jīng)過分離培養(yǎng)的常見具有臨床意義的革蘭氏陽性菌的自動(dòng)鑒定。

【檢驗(yàn)原理】

GP鑒定卡基于已建立的生化方法2、3、7、8、9、10、11、14、20、21、22、23、27、32、37、39及新開發(fā)的底物，

共有檢測碳源利用、酶類活性和耐藥性的 43 種生化試驗(yàn)。最長約需要8小時(shí)獲得最終鑒定

結(jié)果。

【主要組成成份】

詳見“附表 1 革蘭氏陽性細(xì)菌鑒定卡 GP 卡各孔成分"。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

原包裝袋內(nèi)密封儲(chǔ)存于 2～8℃。有效期 18 個(gè)月。

生產(chǎn)日期：詳見外包盒標(biāo)簽。

有效期至：詳見外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析儀（VITEK 2 System）型號(hào)：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（VITEK 2 Compact System）型號(hào)：VITEK 2 Compact

與 VITEK® 2 儀器一起使用時(shí)，GP 卡是一個(gè)用于常規(guī)鑒定大多數(shù)具有臨床意義的革蘭陽

性細(xì)菌的完整系統(tǒng)。需要的材料有：

? VITEK 2 GP 卡

? 電子比濁儀（VITEK® 2 DensiCHEK™ 或 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus kit）

? 電子比濁儀標(biāo)準(zhǔn)濁度管（DensiCHEK™ Plus standards kit）

? VITEK 2 卡架

? 樣本稀釋液（0.45%～0.50%NaCl，pH 4.5～7.0）

? 12 mm x 75 mm 透明塑料（聚苯乙烯）一次性試管

? 無菌棒或拭子

? 合適的瓊脂培養(yǎng)基（參閱附表 2 培養(yǎng)要求表）

可選配件：

? 容積可調(diào)式鹽水分配器

? 接種環(huán)

? 預(yù)裝樣本稀釋液的試管（0.45%~0.50%NaCl 溶液，pH4.5~7.0）

? 試管帽

? 渦旋震蕩器

【樣本要求】

參閱“附表 2 培養(yǎng)要求表"獲取樣本準(zhǔn)備信息。

【檢驗(yàn)方法】

見適用儀器使用手冊(cè)。

警告：未遵守本部分有關(guān)執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室任務(wù)的說明和建議，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤或延遲。

欲詳細(xì)了產(chǎn)品具體信息，請(qǐng)參見培養(yǎng)要求表。

注：根據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，用純培養(yǎng)物制備接種物。如果是混合培養(yǎng)物，則需要重新分離。建議使用菌純度確認(rèn)平板，以確保用于試驗(yàn)的是純培養(yǎng)物。

1） 如果符合培養(yǎng)要求，從原代培養(yǎng)板上選擇分離的菌落；或者將要測試的細(xì)菌轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)沫傊囵B(yǎng)基上傳代培養(yǎng)和相應(yīng)孵育。

2） 以無菌方法，將 3.0 mL 無菌鹽水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH4.5 至 7.0）加入一個(gè)透明的塑料（聚苯乙烯）試管（12mm×75mm）中。

3） 使用無菌棒或拭子接種形態(tài)相同菌落至第二步中準(zhǔn)備的鹽水試管，使用經(jīng)過校準(zhǔn)的電子比濁儀 VITEK 2 DensiCHEKTM Plus 制備相當(dāng)于麥?zhǔn)蠞岫?0.50～0.63 均質(zhì)菌懸液；

注：接種卡片前，菌懸液配制后放置時(shí)間不得超過 30 分鐘。

4） 將菌懸液試管和 GP 卡放入卡架中。

5） 參閱適當(dāng)?shù)膬x器使用手冊(cè)，了解數(shù)據(jù)輸入說明和如何向儀器中裝載卡架；

6）丟棄危險(xiǎn)性廢物時(shí)請(qǐng)遵循所在地監(jiān)管機(jī)構(gòu)的指南。

質(zhì)量控制

質(zhì)量控制細(xì)菌及其預(yù)期結(jié)果列在 VITEK® 2 GP 質(zhì)量控制表中。根據(jù)本文件中規(guī)定的試驗(yàn)菌株操作質(zhì)量控制。

認(rèn)證聲明

茲此證明，bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 質(zhì)量體系規(guī)范 (QSR)關(guān)于微生物鑒定系統(tǒng)設(shè)計(jì)、開發(fā)和制造的要求。

1、試驗(yàn)頻率

目前，建議遵循監(jiān)管機(jī)構(gòu)有關(guān)鑒定產(chǎn)品試驗(yàn)頻率的指南。通常做法是，在收到試劑盒時(shí)實(shí)施 QC。反應(yīng)必須符合說明書結(jié)果。

如結(jié)果不符合標(biāo)準(zhǔn)，傳代純化之后重復(fù)試驗(yàn)，如結(jié)果仍然不符合標(biāo)準(zhǔn)，采用其它鑒定方法，并聯(lián)系 bioMerieux。

2、質(zhì)控菌試驗(yàn)和儲(chǔ)存

? 依廠商說明復(fù)溶菌株；

? 采用含 5% 羊血的胰酶大豆瓊脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 條件下培養(yǎng)大約 18 至 24 小時(shí)。

? 檢查純度。實(shí)施第二次傳代培養(yǎng)，以便試驗(yàn)。

? 采用含 5% 羊血的胰酶大豆瓊脂（TSAB），在 35°C 至 37°C 和 5% 至 10% CO2 條件下培養(yǎng)大約 18 至 24 小時(shí)。

3、儲(chǔ)存條件

短期保存條件

1） 傳代至 TSAB 瓊脂或斜面；

2） 在 35°C 至 37°C 和 CO2 濃度為 5% 至10% 條件下孵育 24 小時(shí)。

3） 在 2°C 至 8°C 下冷藏最長兩周。

4） 按上述要求傳代培養(yǎng)一次，以便用于質(zhì)控。

長期保存條件

1） 用 含 15% 甘油的胰酶大豆肉湯（TSB）配制濃菌懸液。

2） - 70℃冷凍保存；

3） 質(zhì)控前在 TSAB 上傳代兩次。

注：避免反復(fù)凍融，把冷凍保存菌株分裝為單份使用或用無菌涂布棒從冷凍保存的菌中取出少部分使用。

精簡質(zhì)量控制

注：只限工業(yè)使用的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該遵循精簡質(zhì)量控制部分中的內(nèi)容實(shí)施質(zhì)量控制。這些用戶無需額外試驗(yàn)。

因?yàn)椴缓谶\(yùn)輸條件下容易降解的底物，可以通過試驗(yàn)兩個(gè)菌株實(shí)施精簡質(zhì)量控制：一個(gè)在GP 卡上反應(yīng)大多數(shù)情況是陽性，另外一個(gè)在 GP 卡上反應(yīng)大多數(shù)情況是陰性。（請(qǐng)參見 GP質(zhì)量控制表了解詳情。）

全面質(zhì)量控制

不符合精簡質(zhì)量控制測試要求的客戶，需要實(shí)施全面質(zhì)量控制試驗(yàn)，以便證明針對(duì)某鑒定產(chǎn)品每種底物的陽性和陰性反應(yīng)。

欲在開始就符合精簡質(zhì)量控制測試要求，CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)要求用戶實(shí)施和記錄以下兩項(xiàng)中的一項(xiàng)：

• 完成驗(yàn)證試驗(yàn)，以證明其性能符合制造商聲稱的性能。

• 實(shí)施全面質(zhì)量控制測試，應(yīng)該在至少三個(gè)不同季節(jié)至少對(duì)三批產(chǎn)品實(shí)施。

請(qǐng)參閱完整的 CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)，了解如何保持符合要求，以及精簡質(zhì)量控制測試對(duì)于用戶和制造商雙方的要求和責(zé)任。

GP 卡質(zhì)量控制表：

Enterococcus casseliflavus 鉛黃腸球菌 ATCC® 700327™（用于精簡或全面質(zhì)量控制）

Streptococcus salivarius ssp. thermophilus 唾液鏈球菌嗜熱亞種 ATCC® 19258™（用于全面質(zhì)量控制）

Kocuria kristinae 克氏庫克菌 ATCC® BAA-752™（用于全面質(zhì)量控制）

Listeria monocytogenes 單核細(xì)胞增多李斯特菌 ATCC® BAA-751™（用于全面質(zhì)量控制）

Streptococcus pneumoniae 肺炎鏈球菌 ATCC® 49619™（用于全面質(zhì)量控制）

Staphylococcus saprophyticus 腐生葡萄球菌 ATCC® BAA-750™（用于精簡或全面質(zhì)量控制）

Staphylococcus sciuri 松鼠葡萄球菌 ATCC® 29061™（用于全面質(zhì)量控制）

Streptococcus equi ssp. zooepidemicus 馬鏈球菌獸瘟亞種 ATCC® 43079™（用于全面質(zhì)量控制）

Enterococcus saccharolyticus 解糖腸球菌 ATCC® 43076™（用于全面質(zhì)量控制）

鑒定質(zhì)量控制細(xì)菌時(shí)，GP 卡的結(jié)果通常是單選，或在低分辨率或相似細(xì)菌鑒定結(jié)果內(nèi)。但質(zhì)控菌株的選擇是基于反應(yīng)性能而非鑒定性能。因此，在所有預(yù)期的反應(yīng)均正確時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)不能鑒定或鑒定錯(cuò)誤的結(jié)果。